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如何提高悬浮或贴壁细胞的分泌产率？

悬浮培养是大规模细胞培养的理想方式，可采用类似于微生物的方法进行悬浮培养。动物细胞较微生物脆弱，易受剪切力等的影响，而细胞固定化技术可较好的保护细胞免受机械力及环境变化的影响，提高细胞的耐受力，促使细胞高密度培养，提高目的产物的产率。

培养规模。由于各种固定化系统可以获得相同的细胞密度，且细胞的产率主要取决于细胞的扩散，因此反应器的体积是培养规模放大的主要决定因素。虽然微载体系统可以提供最大的单元操作，但其他系统也可以通过增加单元套数而获得放大。（2）培养方式。

基因转染需要一定的转染试剂将带有目的基因的载体运送到细胞内。早期的磷酸钙转染法转染效率很低，且对很多细胞株无效，因此不能满足很多科研工作的需要。目前，最常用的转染试剂是阳离子脂质体和阳离子聚合物，它们在克服细胞屏障方面跟病毒有很相象的特征，容易透过细胞膜。

三角摇瓶 1861年德国科学家Erlenmeyer为了确保样品反应瓶的受热稳定性，改进了加热容器，发明了锥形瓶。比起圆形烧杯来说，这种特殊形状增加了器械的稳定性，不易打翻。另外，在震荡过程中，锥形瓶的“瓶颈”让瓶内液体不易溅出，从而保证了反应体系的稳定性。

从细胞中提取总RNA 培养贴壁细胞：不须消化，可直接用Trizol进行消化、裂解，Trizol体积按250px2/ml比例加入。悬浮细胞可直接收集、裂解，每1ml Trizol可裂解5×106动物、植物或酵母细胞，或107细菌细胞。操作步骤 细胞或组织加Trizol后，室温放置5min，使其充分裂解。注：此时可放入-70℃长期保持。

提高细胞存活率：动物细胞经固定化后，由于有载体的保护作用，可以减轻或免受剪切力的影响，同时动物细胞可附着在载体表面生长，从而可显著提高动物细胞的存活率。（2）提高产率：动物细胞固定化后，可先在生长培养基中生长繁殖，使细胞在载体上形成最佳分布并达到一定的细胞密度。